DNA/RNA熱穩定連接酶

產品編號	產品名稱	規格	價格(元)	說明書
D2902A	DNA/RNA熱穩定連接酶	10T	300
D2902B	DNA/RNA熱穩定連接酶	100T	2,000

5’App DNA/RNA熱穩定連接酶來自嗜熱堿甲烷桿菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是RNA連接酶催化亞基的賴氨酸點突變體。該熱穩定DNA/RNA連接酶催化的連接反應不依賴于ATP，但需要5’預腺苷化的接頭才能將其連接到RNA或單鏈DNA 的3’OH末端。該酶也可催化3’端被2’-O-甲基化的RNA和5’預腺苷化接頭的連接反應。連接反應的最適反應溫度為 60-65℃。即使在ATP存在的情況下，該連接酶也不能使RNA或單鏈DNA的5’端磷酸發生腺苷化，因此降低非特異性的串聯和環化。該酶為熱穩定型，最佳反應溫度為 65℃，此溫度下降低了RNA的二級結構，大大提高連接效率。

組分

組分名稱	數量
Thermostable 5’AppDNA/RNA Ligase (20pmol/μl)	50μl
10×App DNA/RNA Ligase Buffer	100μl
50 mM MnCl2	100μl

應用

二代測序文庫構建中連接單鏈DNA和腺苷化的DNA接頭。

構建小RNA二代測序文庫，可在較高溫度下連接預腺苷化的接頭和RNA。

儲存

-20℃可保存3年。

使用注意事項

1. 1× AppDNA/RNA Ligase Buffer：10mM Bis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10mM MgCl2,1mM DTT。
2. 該酶只能連接5’-端預腺苷化的Oligo接頭到單鏈DNA或RNA的3’-OH基團
3. 當腺苷化底物的5’-端第一個堿基為“C”時，連接效率較差。