產品編號 |
產品名稱 |
規格 |
價格(元) |
說明書 |
D2902A |
DNA/RNA熱穩定連接酶 |
10T |
300 |
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D2902B |
100T |
2,000 |
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5’App DNA/RNA熱穩定連接酶來自嗜熱堿甲烷桿菌(Methanobacterium thermoautotrophicum),是RNA連接酶催化亞基的賴氨酸點突變體。該熱穩定DNA/RNA連接酶催化的連接反應不依賴于ATP,但需要5’預腺苷化的接頭才能將其連接到RNA或單鏈DNA 的3’OH末端。該酶也可催化3’端被2’-O-甲基化的RNA和5’預腺苷化接頭的連接反應。連接反應的最適反應溫度為 60-65℃。即使在ATP存在的情況下,該連接酶也不能使RNA或單鏈DNA的5’端磷酸發生腺苷化,因此降低非特異性的串聯和環化。該酶為熱穩定型,最佳反應溫度為 65℃,此溫度下降低了RNA的二級結構,大大提高連接效率。 |
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組分 |
組分名稱 |
數量 |
Thermostable 5’AppDNA/RNA Ligase (20pmol/μl) |
50μl |
10×App DNA/RNA Ligase Buffer |
100μl |
50 mM MnCl2 |
100μl |
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應用 |
二代測序文庫構建中連接單鏈DNA和腺苷化的DNA接頭。
構建小RNA二代測序文庫,可在較高溫度下連接預腺苷化的接頭和RNA。
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儲存 |
-20℃可保存3年。 |
使用注意事項 |
1. 1× AppDNA/RNA Ligase Buffer:10mM Bis-Tris-Propane- HCl pH 7.0,10mM MgCl2,1mM DTT。
2. 該酶只能連接5’-端預腺苷化的Oligo接頭到單鏈DNA或RNA的3’-OH基團
3. 當腺苷化底物的5’-端第一個堿基為“C”時,連接效率較差。
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