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T4 RNA 連接酶1

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
D2703 T4 RNA 連接酶1 1,000U 400
D2703 10KU 3,000
T4 RNA 連接酶1催化3’→5’磷酸二酯鍵的形成,使核苷酸的5’-磷酸末端和3’-羥基末端連接,伴隨著ATP水解為AMP和PPi。T4 RNA 連接酶1的作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸,它可催化ssDNA和RNA的連接,相對于ssDNA,該酶對RNA分子的連接和環化效率更高。 T4 RNA連接酶I

組分

組分名稱 數量
T4 RNA Ligase1 (10 U/μl) 100μl
10×T4 RNA Ligase Buffer 250μl
10mM ATP 100μl
50% PEG 8000 500μl

應用

  • 連接單鏈RNA和DNA
  • RNA 3’末端標記
  • RNA和DNA分子內和分子間連接
  • 合成單鏈寡脫氧核苷酸
  • 蛋白質中摻入非天然氨基酸
  • 活性定義

    1單位指在1×T4 RNA Ligase Buffer 中,37℃條件下,30分鐘內將1nmol的5’-[32P]rA16轉化為磷酸鹽不溶物質所需要的酶量。

    儲存

    -20℃可保存3年。

    使用注意事項

    1.1× T4 RNA Ligase Buffer:50mM Tris-HCl pH 7.5,10mM MgCl2,1mM DTT。該酶反應時需要加入終濃度1mM ATP。
    2. 最佳反應溫度37℃,65℃ 10min可使該酶失活。
    3. 該酶的連接底物無論是ssDNA還是ssRNA均需要5’-磷酸化或預腺苷化。
    4. 該酶不能連接雙鏈DNA或RNA。
    5. 加入終濃度5~10% PEG 8000或增加孵育時間可提高連接效率。
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