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血清/血漿miRNA提取試劑盒

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
B1804 血清血漿miRNA提取試劑盒 25T/100T 800/2400
血清血漿miRNA含量較組織細胞或外周血低,市面上現有的試劑盒提取血清血漿小RNA的得率普遍較低,因此很難用于后續的定量檢測。新海基因血清血漿miRNA提取試劑盒通過一步上柱即可獲得高純度miRNA,可在10min左右完成小RNA的提取,是目前提取小RNA(<200nt)操作步驟最簡單、重復性最好、小RNA產率最高的方法。使用該試劑盒提取的小RNA(Small RNA)中,長度在15~200nt范圍的RNA在95%以上,基本不含有大RNA和DNA,可直接用于后續的反轉錄、Northern 雜交、測序等應用。

組分

名稱 數量
B1804A B1804B
Serum/Plasma miRNA Reagent 15ml 60ml
miRNA 吸附柱 25套 100套
RnaseFree TE Buffer 5ml 5ml

儲存

室溫可保存2年。

常見問題

(1) 由于血清血漿中的miRNA含量極低,提取的miRNA濃度通常在5 ng/μl以下,因此難以用常規的NanoDrop測量濃度,建議直接使用10μl進行下游反轉錄。由于本試劑盒提取的是小RNA,該濃度下的miRNA Copy數足以進行下游檢測。
(2) 由于血清血漿中miRNA的含量低,為了獲得更可靠的實驗數據,建議使用特異性和靈敏度更好的TaqMan探針法進行miRNA的下游檢測。本試劑盒提取的miRNA并不限于其它檢測方法和用途,包括SYBR Green法檢測、二代測序、芯片等檢測領域。
(3) 新海基因的D1803血清血漿TaqMan miRNA反轉錄試劑盒為血清血漿專用,不可用于細胞和組織的miRNA檢測實驗。使用D1803獲得的反轉錄產物僅可使用本公司的HG TaqMan miRNA qPCR試劑盒(貨號:TAPXXXXX)。在使用D1803反轉錄條件下,應用貨號為TAP01511檢測內源hsa-miR-16, Ct值通常在24左右。
(4)外源性內參可單獨訂購cel-miR-39 標準品(貨號:B1805),每個樣品每次提取cel-miR-39的使用量為50fmol。
(5)抗凝血劑要避免使用含有肝素的凝血管,因為肝素會抑制反轉錄 (reverse tranion) 和聚合酶 (polymerase) 的反應。

實例

1.不同血清體積對定量PCR的影響,以hsa-miR-16 qPCR為例,反轉錄應用血清血漿TaqMan miRNA反轉錄試劑盒(D1803),定量PCR試劑盒用TAP01511。
血清血漿miRNA提取試劑盒
2.應用該血清血漿miRNA提取試劑盒(B1804)從500μl的血清樣本中獲得小RNA,血清血漿TaqMan miRNA反轉錄試劑盒(D1803)進行反轉錄,然后用HG TaqMan miRNA定量試劑盒分別檢測不同的8種miRNA表達。
血清血漿miRNA定量PCR
 
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