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RTS 表達感受態細胞

產品編號 產品名稱 規格 價格(元) 說明書
K0003 RTS BL21(DE3) Chaprone感受態細胞 10T 800
K0004 RTS Arctic(DE3)感受態細胞 10T 500
K0005 RTS BL21(DE3)plysS感受態細胞 10T 500
K0006 RTS Rosetta2(DE3)感受態細胞 10T 500
K0007 RTS OrigamiB(DE3)感受態細胞 10T 500
K0008 RTS BL21-Codonplus-RIPL 感受態細胞 10T 500
K0009 RTS SHuffle T7 E.coli 感受態細胞 10T 500
K0010 RTS BL21(DE3)感受態細胞 10T 500
RTS(Room Temperature Stable)系列感受態細胞為HaiGene獨有的化學感受態專利技術制備,其室溫可保存7天、-20°C可保存2年(推薦保存溫度)、-80°C可長期保存性能無下降。運輸過程中無需干冰,可常規冰袋運輸(推薦運輸溫度)。RTS表達感受態細胞均為熱激感受態細胞,轉用于蛋白表達(不可用于克隆和載體構建),經42°C熱激1min可獲得105~106cfu/μg效價,可滿足質粒轉化要求。該制品使用簡單、運輸、儲存方便。

組分

組分名稱 數量
RTS Competent Cell(10T) 1瓶
Nano E.coli Transfection Reagent 1 ml

儲存

RTS系列感受態為干粉形式,均可室溫保存3天,長期保存-20°C(2年)。經Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受態必須分裝后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受態細胞避免反復凍融,在-60°C以下可保存6個月。

使用方法

1. 從-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent徹底融化,放置于冰上。
注意:該試劑含長鏈帶電化合物,允許反復凍融20次,使用完畢后繼續-20°C保存。
2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2 ml EP管中,加入10~100 ng質粒DNA(不可使用連接產物),槍頭吹打混合均勻,冰上放置2min。
注意:放置時間不要超過30min,過長時間會導致核酸聚合,從而影響轉化效價。
3. 將上述混合物(50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和質粒DNA)加入到一支RTS表達感受態細胞干粉中,槍頭輕輕吹打,徹底溶解細胞干粉,置于冰上15min。
注意:使用RTS 表達感受態細胞干粉前,輕甩干粉至管底部,如果發現干粉已經溶解則不可使用。
4. 置于42°C熱激1min后,迅速置于冰上急冷2min。
5. 將熱激完畢的感受態細胞轉移到含有450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培養基,37°C振蕩(225 rpm)培養60min。使質粒上抗性標記基因表達,菌體復蘇。
6. 取200 μl復蘇菌液涂布到含相應抗生素的LB瓊脂平板表面。
7. 將平板置于37°C培養,12~18小時后可出現菌落。
8. 獲得的表達菌,可使用IPTG進行誘導表達,從而獲得重組蛋白。

 
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